問答題
【簡(jiǎn)答題】用一限制性內(nèi)切核酸酶切割 Lac+Tetr的質(zhì)粒載體,已知該酶識(shí)別的是4個(gè)堿基序列,并產(chǎn)生有兩個(gè)堿基突出的單鏈末端,該酶在 lac 基因內(nèi)有切割位點(diǎn),并在第二個(gè)氨基酸密碼子內(nèi),該位點(diǎn)可以被任何氨基酸所取代而不影響酶活性。用該酶切割后,用 DNA聚合酶將單鏈末端補(bǔ)齊為雙鏈的平末端,然后重新連接成環(huán),轉(zhuǎn)化 Lac-Tets受體菌,篩選 Tet 轉(zhuǎn)化子,問:Lacr的基因型是什么?并說明原因。
答案:
基因型是lac- 原因是在該密碼子中插入了兩個(gè)堿基,造成了移碼突變,所以Lac的基因是缺陷的。