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問答題
【簡答題】用 EcoRI和 HindⅢ分別切割同一來源的染色體 DNA,并進(jìn)行克隆,在前者的克隆中篩選到 A基因,但在后者的克隆中未篩選到 A基因,請說明原因。
答案:
原因是:HindⅢ的切點(diǎn)在 A基因內(nèi)。
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問答題
【簡答題】一個(gè)攜帶有氨芐和卡那霉素抗性基因的質(zhì)粒被僅在卡那霉素基因中有識(shí)別位點(diǎn)的EcoRI消化。消化物與酵母 DNA 連接后轉(zhuǎn)化對(duì)兩種抗生素都敏感的 E.coli 菌株。 (1)利用哪一種抗生素抗性選擇接受了質(zhì)粒的細(xì)胞? (2)怎樣區(qū)分接受了插入酵母 DNA的質(zhì)粒的克隆?
答案:
(1)選擇Amp
r
的轉(zhuǎn)化子;
(2)所需的克隆是Amp
r
和Kan
r
。任何能夠抗這兩種藥物的克隆都是自連的非重組質(zhì)粒。
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問答題
【簡答題】插入失活和插入表達(dá)法篩選重組體的主要差別是什么?
答案:
主要差別是:插入失活法是直接根據(jù)失活基因的表型變化來篩選重組體;插入表達(dá)是根據(jù)一個(gè)基因的失活引起另一個(gè)基因的表達(dá)表型來選...
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