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A.兩條引物的Tm值相差盡量大
B.G+C的含量應(yīng)在45％-55％之間
C.盡量避免引物二聚體的出現(xiàn)
D.反應(yīng)體系中引物的濃度一般在0.1~0.2μmol/L之間
E.引物過長可能提高退火溫度

A.實驗中的干預(yù)因素對內(nèi)參基因表達沒有影響
B.通常選用內(nèi)源性的管家基因作為內(nèi)參基因，如GAPDH、β-actin和rRNA等
C.任何管家基因都適合任何實時熒光定量PCR試驗
D.能與待測目的基因同時進行相同的PCR擴增
E.在待測樣本中的表達是穩(wěn)定的