如圖是將人類的生長(zhǎng)激素基因?qū)爰?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的示意圖，所用的載體為質(zhì)粒A。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因，質(zhì)粒導(dǎo)入細(xì)菌B后，其上的基因能得到表達(dá)。簡(jiǎn)述重組質(zhì)粒的主要過(guò)程包括：①（）；②（）；③（）。

在獲得目的基因的過(guò)程中，PCR技術(shù)相當(dāng)重要。PCR擴(kuò)增反應(yīng)需要在一定的緩沖溶液中加入DNA模板、分別與兩條模板鏈相結(jié)合的兩種（）、四種脫氧核苷酸和（）的DNA聚合酶。

圖中的III是導(dǎo)入了目的基因的受體細(xì)胞，經(jīng)培養(yǎng)、篩選最終獲得一株有抗蟲特性的轉(zhuǎn)基因植株。經(jīng)分析，該植株含有一個(gè)攜帶目的基因的DNA片段，因此可以把它看作是雜合子。理論上，在該轉(zhuǎn)基因植株自交產(chǎn)生的F1中，仍具有抗蟲特性的植株占總數(shù)的（），原因是（）。

“分子運(yùn)輸車”是（）。

圖中①一般經(jīng)（）處理可以得到③，從③到④的過(guò)程中涉及到的生物技術(shù)有（）和（）。

導(dǎo)入細(xì)菌B細(xì)胞的目的基因成功表達(dá)的標(biāo)志是什么？

普通番茄細(xì)胞導(dǎo)入目的基因后，先要接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上培養(yǎng)，經(jīng)脫分化過(guò)程后得到愈傷組織，然后再轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上，誘導(dǎo)出試管苗，然后進(jìn)一步培養(yǎng)成正常植株。獲得的轉(zhuǎn)基因植物經(jīng)有性生殖獲得的后代，是否也具有轉(zhuǎn)基因特性？

科學(xué)家最初在做抗蟲實(shí)驗(yàn)時(shí)，雖然用一定的方法已檢測(cè)出棉花的植株中含有抗蟲基因，但讓棉鈴蟲食用棉的葉片時(shí)，棉鈴蟲并沒有被殺死，這說(shuō)明（）。科學(xué)家在研究的基礎(chǔ)上又一次對(duì)棉花植株中的抗性基因進(jìn)行了修飾，然后在讓棉鈴蟲食用棉的葉片，結(jié)果食用的第二天棉鈴蟲就死亡了。

被①處理后的分散細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，通常要在培養(yǎng)液中添加一定量的（），此外應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，以便保證被培養(yǎng)的細(xì)胞處于無(wú)菌無(wú)毒的環(huán)境中進(jìn)行培養(yǎng)。

操作步驟：從人的（）獲取目的基因；目的基因與（）結(jié)合構(gòu)建基因表達(dá)載體；在基因表達(dá)載體中還應(yīng)插入（）和終止子。然后把基因表達(dá)載體導(dǎo)入牛的（），通過(guò)發(fā)育形成的牛體細(xì)胞含人的（），成熟的牛產(chǎn)的的奶中含有（），證明基因操作成功。