問答題

【簡答題】當(dāng)兩種限制酶反應(yīng)條件不同時,若要用雙酶切,應(yīng)采取什么措施?為什么?

答案: 要避免星活性及部分酶切。
(1)先用低鹽緩沖液中活性最高的酶切,再補(bǔ)鹽和第二種酶;
(2)用一種酶消...
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問答題

【簡答題】如果用EcoRI酶切DNA時出現(xiàn)星活性,試分析原因?

答案:

主要原因有:酶濃度太高;高PH;低鹽;含Mn2+、Cu2+等非Mg2+金屬離子;甘油濃度高于5%;存在某些有機(jī)溶劑。

問答題

【簡答題】在酶切緩沖液中加入牛血清白蛋白(BSA)的目的與機(jī)理是什么?

答案:

目的是保護(hù)酶的活性;機(jī)理是通過提高反應(yīng)體系中蛋白質(zhì)的濃度,防止內(nèi)切酶失活。

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