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【簡答題】基因敲除的基本程序是什么?
答案:
通過DNA同源重組,使得胚胎干細胞特定的內(nèi)源基因被破壞而造成功能喪失,然后通過胚胎干細胞介導得到該基因喪失的小鼠模型的過...
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【簡答題】簡述轉(zhuǎn)基因動物的概念、原理及應用。
答案:
1、概念:是指用人工方法將外源基因?qū)牖蛘系交蚪M內(nèi),并能穩(wěn)定傳代的一類動物。它的特點是“分子及細胞水平操...
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【簡答題】真核細胞表達外源基因的條件是什么?
答案:
1、首先必須具備哺乳動物細胞表達的功能元件。要求哺乳動物細胞表達載體帶有能在真核細胞中表達外源基因的真核轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件;<...
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【簡答題】大腸桿菌系統(tǒng)表達外源基因必須具備的條件有哪些?
答案:
1、要求外源基因的編碼區(qū)不能含有內(nèi)含子;
2、表達的外源片段要位于大腸桿菌啟動子的下游,并形成正確的閱讀框架;...
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【簡答題】影響大腸桿菌系統(tǒng)外源基因表達的因素有哪些?
答案:
1、啟動子的強弱;
2、基因的劑量;
3、影響RNA轉(zhuǎn)錄和翻譯效率的因素:SD序列、mRNA;
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【簡答題】PCR引物設計的基本要求是什么?
答案:
1、引物長度一般為15~30個核苷酸。過短影響PCR的特異性,過長會提高相應退火溫度,使延伸溫度超過TaqDNA聚合酶最...
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【簡答題】PCR的基本原理是什么?
答案:
PCR是在試管中進行的DNA復制反應,基本原理是依據(jù)細胞內(nèi)DNA半保留復制的機理,以及體外DNA分子于不同溫度下雙鏈和單...
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【簡答題】探針的標記法有哪些?
答案:
探針的標記法?
答:1、缺口平移法:此法是利用適當濃度的DNaseⅠ在DNA雙鏈上隨機切割單鏈,造成單鏈切口。...
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【簡答題】探針的種類和優(yōu)缺點有哪些?
答案:
1、cDNA探針:通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA后,將其克隆于適當?shù)目寺≥d體,通過擴增重組質(zhì)粒而使cDNA得到大量的擴增。提取質(zhì)...
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【簡答題】影響雜交的因素有哪些?
答案:
1、核酸分子的濃度和長度:核酸濃度越大,復性速度越快。探針長度應控制在50-300個堿基對為好。
2、溫度:溫...
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【簡答題】核酸分子雜交的原理是什么?
答案:
具有互補序列的兩條單鏈核酸分子在一定的條件下(適宜的溫度及離子強度等)堿基互補配對結(jié)合,重新形成雙鏈;在這一過程中,核酸...
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