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問答題

在細(xì)菌質(zhì)粒 pBPI的四環(huán)素抗性基因 tet^R的中間有一個 HindⅡ的切點。用 Hind Ⅲ切割果蠅基因組 DNA，以 pBPl 為載體構(gòu)建基因組文庫。分子雜交證明克隆 15 帶有果蠅的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV對克隆 15 進(jìn)行了酶切分析，電泳結(jié)果如圖 15．1（用酶切的 pBPl質(zhì)粒 DNA作對照），旁邊標(biāo)出了片段的大小。

如果用克隆在另一個與 pBPl完全不同源載體上的四環(huán)素抗性基因作為探針進(jìn)行 Southern 印跡雜交，預(yù)測上述電泳圖會出現(xiàn)什么樣的雜交帶？

參考答案： 除 No.2 的2.5kb，No.6 的1.5kb 和1.0kb 沒有帶外，其他都有帶。

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1.問答題 在細(xì)菌質(zhì)粒 pBPI的四環(huán)素抗性基因 tet^R的中間有一個 HindⅡ的切點。用 Hind Ⅲ切割果蠅基因組 DNA，以 pBPl 為載體構(gòu)建基因組文庫。分子雜交證明克隆 15 帶有果蠅的目的基因。用 Hind Ⅲ和 EcoRV對克隆 15 進(jìn)行了酶切分析，電泳結(jié)果如圖 15．1（用酶切的 pBPl質(zhì)粒 DNA作對照），旁邊標(biāo)出了片段的大小。

繪制含有插入片段和不含插入片段時的 pBPl 的限制性圖譜，并標(biāo)明四環(huán)素抗性基因的位置；

參考答案：

2.問答題計算下列三種酶各自在某染色體 DNA 序列上識別位點間的平均距離：

參考答案：

3.填空題DNA連接酶的單位通常用 Weiss 單位表示，一個 Weiss單位是：（）。

參考答案：在37℃下20分鐘內(nèi)催化焦磷酸交換1nmol32p到ATP所需要的酶量

4.填空題原核生物主要有兩種類型的 DNA連接酶：E．coliDNA連接酶和 T4DNA 連接酶?；蚬こ讨惺褂玫闹饕?#160;T4DNA連接酶，它是從 T4 噬菌體感染的 E．coli 中分離的種單鏈多肽酶，分子量為——』Oa，由 T4 噬菌體基因——編碼。E．coli DNA連接是由大腸桿菌基因一編碼，也是一條多肽鏈的單體，分子量為（）kDa。這兩DNA 連接酶有兩個重要的差異：第一是它們在催化反應(yīng)中所用的能量來源不同，TDNA連接酶用（），而 E．coli DNA連接酶則用（）作為能源。第是它們催化平末端連接的能力不同，在正常情況下只有T4DNA連接酶能夠連接平末端E．coliDNA連接酶則不能。即使是調(diào)整反應(yīng)條件，E．coli DNA連接酶催化平末端連接效率也只有 T4 DNA連接酶的（）。

參考答案：68、30、51、74；ATP；NAD；1／100

5.填空題連接酶（ligase）是一類用于核酸分子連接形成（）鍵的核酸合成酶，有DNA連接酶RNA連接酶之分。

參考答案：磷酸二酯