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【論述題】已知目的的cDNA序列,擬采用基因工程技術(shù)使其在哺乳細(xì)胞中表達(dá),請(qǐng)寫出設(shè)計(jì)方案。
答案:
提取目的基因的mRNA,逆轉(zhuǎn)錄生成cDNA,根據(jù)已知的cDNA序列設(shè)計(jì)引物,以cDNA為模板進(jìn)行PCR,瓊脂糖凝膠電泳,...
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問答題
【論述題】你在做Southern印跡分析,并且剛完成了凝膠電泳這一步。根據(jù)方案,下面一步驟是用NaOH溶液浸泡凝膠,使DNA變性為單鏈。為了節(jié)省時(shí)間,你略過了這一步,直接將DNA從凝膠轉(zhuǎn)至硝酸纖維素膜上。然后用標(biāo)記探針雜交,最后發(fā)現(xiàn)放射自影片是空白。錯(cuò)在哪里?試分析其原因。
答案:
錯(cuò)在了膜上的DNA沒有變形為單鏈,所以無法和探針結(jié)合,所以最后發(fā)現(xiàn)放射自影片是空白。當(dāng)然,也有可能是實(shí)驗(yàn)時(shí)膜上的DNA和...
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問答題
【論述題】現(xiàn)在對(duì)人類基因組的主要研究工作是進(jìn)行基因組的序列測定。然而,有人根據(jù)人類基因組是由重復(fù)序列組成為由,認(rèn)為反復(fù)對(duì)同一種DNA進(jìn)行測序是不明智的。你能否擬定兩份計(jì)劃,一份計(jì)劃應(yīng)保證僅僅單一序列DNA被測序,第二個(gè)計(jì)劃應(yīng)允許僅僅轉(zhuǎn)錄的單一DNA序列被測序。請(qǐng)簡述你的兩份計(jì)劃。
答案:
計(jì)劃一:進(jìn)行一個(gè)復(fù)性實(shí)驗(yàn),在從不同的溫育時(shí)間取出等量樣品。當(dāng)所有重復(fù)DNA都發(fā)生退火時(shí),從反應(yīng)中去除雙鏈DNA(可以使用...
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