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問答題
【簡答題】當兩種限制性內(nèi)切核酸酶的作用條件不同時,若要進行雙酶切,應(yīng)采取什么措施?為什么?
答案:
注意星活性,先低鹽,后高鹽;先低溫酶,后高溫酶。這樣可以直接在換酶前使第一種酶失活,再加第二種酶,否則易產(chǎn)生星活性?;蚴?..
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【簡答題】用酚抽提蛋白質(zhì)時,離心后,為什么蛋白質(zhì)總是會停留在水相和酚相之間?
答案:
酚使蛋白分子間脫水而變性,變性蛋白的密度比水大,但比酚小,因此停在中間。
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【簡答題】某學生在用EcoRI切割外源DNA片段時,出現(xiàn)了星號活性,請分析可能的原因?
答案:
答鹽離子濃度不對,溫度不對,甘油濃度過高。
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